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探討腫瘤相關巨噬細胞分泌之外泌體對於星狀膠質瘤的影響

為了解決675 cargo tracking的問題，作者徐聖昀 這樣論述：

膠質瘤是致命的癌症，由於其異質性腫瘤微環境而具有很高的復發能力。細胞外囊泡（Extracellur Vescles）在腫瘤微環境扮演的角色起著越來越重要,尤其是外泌體(Exosome)做為細胞間通信的媒介是最為常見的細胞外囊泡。我們實驗室之前的研究發現老鼠星形細胞瘤細胞ALTS1C1與BV2細胞或骨髓來源的M2巨噬細胞能相互作用，例如化學抗性和集落形成。因此，我們專注於研究兩種腫瘤相關巨噬細胞的外泌體對於ALTS1C1細胞的作用。我們使用沉澱法的方式純化外泌體，並通過奈米粒子跟蹤分析儀，西方墨點法和穿透式電子顯微鏡來確認外泌體的特性。我們的結果發現Raw264.7和BV2細胞所分泌的外泌體都

可以被ALTS1C1細胞攝取，但只有BV2外泌體對ALTS1C1細胞具有劑量反應，包括細胞形態變化，誘導細胞增殖和遷移能力以及改變ALTS1C1細胞中DEDD和VEGFa的表現水平。此外，BV2細胞所分泌的外來體可增加腫瘤血管的功能並減少缺氧區域，但在肌肉內模型腫瘤中卻意外地延遲了腫瘤的生長，並增加了胞毒性T細胞(CD8+)的比例。

不同氧濃度培養臍帶間質幹細胞的特性及其胞外囊泡內容研究

為了解決675 cargo tracking的問題，作者楊蕓榕 這樣論述：

胞外囊泡 (Extracellular vesicles) 包括外泌體直徑約在30至150 nm，為雙層磷脂質結構，作為細胞間溝通的橋樑。臍帶間質幹細胞具有自我更新（self-renewal）及細胞分化的特性，與原始幹細胞（naive stem cells）不同，其生長代數會隨著環境因素而改變。臍帶間質幹細胞與其分泌之胞外囊泡具有高度相似的生物學功能。文獻指出胞外囊泡在組織工程和慢性疾病的治療極具潛力。若在合適條件下培養的臍帶間質幹細胞，可將其胞外囊泡作為無細胞移植（cell-free transplant）之治療工具。然而目前還無法釐清，不同的培養環境下，臍帶間質幹細胞所生成的胞外囊泡是否

影響治療能力。為了找到更高的能力和有用的療法來挽救衰老的臍帶間質幹細胞，我們假設低氧環境可以促進生長代數，並分泌較佳的胞外囊泡去促進再生醫療所用。 本研究探討了不同培養條件對臍帶間質幹細胞產生之胞外囊泡含量和功能的影響。從臍帶華頓氏膠質中分離的臍帶間質幹細胞在正常氧或低氧條件下進行培養，用於細胞繼代和收集胞外囊泡。臍帶間質幹細胞的表面標記物通過流式細胞儀確認，胞外囊泡的表面標記也用流式細胞儀和西方氏墨點法檢測。老化相關的β-半乳糖苷酶染色用於評估細胞衰老。胞外囊泡的大小和濃度通過奈米粒子追蹤分析儀進行了分析。胞外囊泡的生長素含量通過多重酵素結合免疫吸附分析法檢測技術測量，並使用西方氏墨

點法和即時聚合酶連鎖反應分析細胞的衰老途徑。在低氧條件下（1％氧氣）培養的臍帶間質幹細胞表現出更好的增殖和更長的代數，比正常氧氣培養的更少凋亡（9.3% vs. 66.3%在第九代）和衰老細胞（26% vs. 97%在第九代）。來自低氧培養物的胞外囊泡的尺寸較小（96.6 ± 1.8 nm vs.124.5 ± 17.6 nm 在第九代），在低氧和正常氧條件下的胞外囊泡的生長素含量是血管內皮生長因子（VEGF）和顆粒球生長素（G-CSF）不同。源自低氧培養的胞外囊泡可以挽救在正常氧條件下培養的臍帶間質幹細胞的老化。 總結而言臍帶間質幹細胞在低氧下生長率較好，死亡和老化較少; 其所分泌

的胞外囊泡較小、富含生長素、又可以救援幹細胞的老化。使用低氧培養的條件製造臍帶間質幹細胞胞外囊泡或可替代細胞執行無細胞的再生醫學移植。