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肝癌細胞線粒體在ROS生成下HSP60介導並調控MAPK信號傳遞的分子機制

為了解決dp線144hz的問題，作者JayaPrakash Mandal 這樣論述：

Our previous studies showed that mitogen-activated protein kinases (MAPKs) are activated by the interaction of protein kinase C (PKC) and reactive oxygen species (ROS) for hepatocellular carcinoma (HCC) progression. However, the relevant mechanisms remained to be clarified in more detail. In this s

tudy, we used two hepatoma cell lines HepG2 and HCC340 as models to investigate the comprehensive ROS-PKC signaling triggered by tumor promoter 12-O-tetradecanoyl-phorbol-13-acetate (TPA). Since mitochondria-derived reactive oxygen species (mtROS) signaling is well known to be involved in tumor prog

ression, we examined whether TPA triggers the generation of mtROS that can crosstalk with PKC. By mtROS assay, TPA maximally induced mtROS generation at 10 min, which could be prevented by the mitochondria-specific scavenger of mtROS, MitoTEMPO. By western blot, we observed TPA induced transient pho

sphorylation of ERK/JNK and expression of transcriptional factors c-jun/c-fos. Using inhibitors of PKC isozymes and mitoTEMPO, the signal pathway was proved to be transmitted in mtROS/PCK-dependent manner. By BIAM-labeling coupled with LC-MS/MS, heat shock protein 60 (HSP60) was identified as the m

ajor oxidative target. Moreover, suppression of HSP60 by HSP60shRNA, HSP60 inhibitor mizoribine, and expression of dominant-negative HSP60 Cys-mutant prevented TPA-induced phosphorylation of MAPKs and expression of c-jun. In the mechanistic study, for oxidation of HSP60 leading to MAPK activation, w

e found Raf kinase inhibitor protein (RKIP), a negative regulator of MAPK and well-known metastatic suppressor, was involved. Using immunoprecipitation (IP)/Western blot analysis, we found TPA induced the dissociation RKIP from HSP60 within 30 min in both HCCs which can be attenuated by inhibitor of

PKC delta, mtROS scavenger and HSP60 Cys-mutant. At the same time, translocation of HSP60 coupled with MAPK from mitochondria to cytosol was observed. These were closely associated with the robust phosphorylation of MAPKs in the cytosol. By transwell migration assay and cell cycle analysis, TPA ind

uced G1 cell cycle arrest and cell migration, respectively, two dichotomous phenotypical changes of HCCs. Such phenotypes were prevented by the inhibitor of mtROS and knockdown of PKC and HSP60. Several migratory genes such as MMP1/3 (matrix metalloproteinase), LAMC2 (laminin????2), Hic-5 (hydrogen

peroxide inducible clone-5), and a miR-6134, targeting CCNE1 (cyclin E1) were upregulated by TPA. In addition, transcriptional system AP-1 (c-jun/c-fos) regulated TPA-induced migratory genes and miR-6134.In conclusion, we established TPA-induced PKC-mtROS-HSP60 (RKIP)-MAPK-(AP-1) signal axis requi

red for regulating gene expressions triggering dichotomous phenotype in HCCs. Several key players in this pathway such as PKCδ, RKIP, and HSP60 are promising candidates for targeted therapy to prevent HCC progression.

提升脊椎後位固定手術穩定性之生物力學研究

為了解決dp線144hz的問題，作者劉慕義 這樣論述：

目錄中文摘要 iAbstract iv目錄 viii圖目錄 xii第一章、緒論 11.1 研究背景與動機 11.2 研究目的 31.2.1 椎弓骨釘幾何設計-雙心雙螺紋椎弓骨釘 31.2.2 骨釘植入路徑-改良式植入路徑 61.2.3 橫連裝置-最佳化的使用方式 8第二章、文獻回顧 112.1 脊椎之解剖構造與生物力學特性 112.1.1 椎體的生物力學特性 132.1.2 椎間盤之生物力學特性 132.1.3 小面關節之生物力學特性 142.1.4 韌帶之生物力學特性 152.1.5 椎弓根之生

物力學特性 152.2 脊椎的病變及治療方式 182.2.1 骨質疏鬆症 222.2.2 椎體壓迫性骨折 242.2.3 椎體整形術 272.2.4 椎體融合手術 282.3 脊椎固定裝置 332.3.1 小面關節骨釘 342.3.2 椎弓骨釘 362.3.3 橫連裝置 49第三章、材料與方法 533.1 椎弓骨釘幾何設計-雙心雙螺紋 533.1.1 實驗架構 533.1.2 實驗流程 593.1.3 實驗材料與設備 623.2 骨釘植入路徑-改良式植入路徑 663.2.1 實驗架構 663.

2.2 實驗流程 693.2.3 實驗材料與設備 743.3 橫連裝置-最佳化的使用方式 763.3.1 實驗架構 763.3.2 實驗流程 793.3.3 實驗材料與設備 82第四章、初步結果 834.1 椎弓骨釘幾何設計-雙心雙螺紋 834.1.1 單節L4人造椎體 834.1.2 骨質疏鬆測試塊 864.2 骨釘植入路徑-改良式植入路徑 884.2.1 單節椎體 884.2.2 單一活動單元 914.3 橫連裝置-最佳化的使用方式 954.3.1 多節豬脊椎 95第五章、討論 985.1 椎弓

骨釘幾何設計-雙心雙螺紋椎弓骨釘 985.1.1 骨釘設計對固定效果的影響 985.1.2 雙心雙螺紋骨釘的設計驗證 1005.1.3 人造骨材的實用性 1035.1.4 骨水泥使用量的影響 1055.1.5 限制 1065.2 骨釘植入路徑-改良式植入路徑 1085.2.1 路徑對拉出強度的影響 1085.2.2 植入扭矩與穩定性 1095.2.3 不同動作模式的力學表現 1115.2.4 實驗結果與臨床回顧 1115.2.5 限制 1145.3 橫連裝置-最佳化的使用方式 1155.3.1 數量與位置的影響

1155.3.2 實驗結果與臨床文獻探討 1185.3.3 限制 120第六章、結論與未來展望 1226.1 結論 1226.1.1 椎弓骨釘幾何設計-雙心雙螺紋椎弓骨釘 1226.1.2 骨釘植入路徑-改良式植入路徑 1226.1.3 橫連裝置-最佳化的使用方式 1226.2 未來展望 123參考文獻 127附錄 149圖目錄圖1-1、雙心雙螺紋骨釘植入椎體之示意圖。 5圖1-2、三種不同路徑示意圖。 7圖1-3、使用不同數量及位置之橫連裝置（cross-link）。 10圖2-1、脊椎單一活動單元之各部位名稱。

11圖2-2、椎體解剖構造[24]。 12圖2-3、椎間盤構造[27]。 14圖2-4、椎弓骨釘植入至椎體與植入至椎弓時之勁度[15]。 16圖2-5、椎骨各斷面之結構層（左）與骨質密度（右）[30]。 17圖2-6、後側融合手術示意圖[33]。 19圖2-7、椎板切除手術示意圖[35]。 21圖2-8、正常椎體（左）與骨質疏鬆椎體（右）。 22圖2-9、椎體骨折分類[39]。 24圖2-10、椎體整形術手術方式。. 28圖2-11、椎弓根破裂情形[50]。 30圖2-12、脊椎內固定器與補骨之間，受力與時間的對應關係[47]

。 34圖2-13、不同小面關節骨螺釘固定方式之脊椎融合手術[58]。 35圖2-14、不同的骨釘型態[61]。 37圖2-15、FOA面積計算[66]。 40圖2-16、不同之螺紋型態[61]。 41圖3-1、椎弓骨釘幾何設計之研究架構圖。 54圖3-2、圓柱型骨釘之設計圖。 55圖3-3、錐度型骨釘之設計圖。 56圖3-4、中空型骨釘之設計圖。 57圖3-5、骨釘之實體照片。 58圖3-6、Sawbone人造骨材。 59圖3-7、試件製備流程。 60圖3-8、骨釘拉出測試實驗架設圖。

61圖3-9、中空骨釘注射骨水泥。 61圖3-10、九種骨釘之實體繪製圖。 63圖3-11、壓克力樹脂（左：壓克力粉；右：硬化劑）。 64圖3-12、電子式扭力扳手。 65圖3-13、骨釘植入路徑之實驗架構圖。 67圖3-14、不同路徑骨釘之設計圖。 68圖3-15、椎弓骨釘之實體照片。 69圖3-16、實驗試件製備。 70圖3-17、骨釘拉出測試架設圖。 71圖3-18、臨床級椎弓骨釘。 72圖3-19、三種不同動作模式之測試架設圖。 73圖3-20：骨釘拉出測試架設圖。 73圖3-21、本研究所使用之橫連裝置與椎弓

根骨釘。 76圖3-22、不同數量及位置之橫連裝置（cross-link）。 78圖3-23、橫連裝置之研究流程圖。 77圖3-24、試件製備流程。 79圖3-25、四種運動型態實驗架設圖。 80圖4-1、雙心雙螺紋骨釘於植入L4人造椎體之 X光圖。 83圖4-2、圓柱及圓椎型骨釘之拉出測試結果。 85圖4-3、鎖入扭矩與拉出強度之線性迴歸圖表。 85圖4-4、中空骨釘於植入骨質疏鬆測試塊之 X光圖。 86圖4-5、雙心雙螺紋骨釘與粗螺紋骨釘之最高拉出強度。 87圖4-6、三種不同路徑植入豬脊椎後之X光影像。 89圖4-7、三種

不同路徑之骨釘平均最高拉出強度。 89圖4-8、三種不同路徑之骨釘平均植入扭矩。 91圖4-9、椎弓骨釘以三種不同路徑植入豬脊椎後之X光影像。 92圖4-10、在三種不同動作模式下之平均椎體勁度值。 92圖4-11、三種不同路徑植入活動單元椎體之平均最大拉出強度。 93圖4-12、三種不同路徑植入豬脊椎後之骨釘平均植入扭矩。 94圖4-13、各組後位固定裝置植入椎體之X光影像圖。 95圖4-14、各組豬隻脊椎在三種不同動作模式下之勁度值圖表。 96圖4-15、各組豬隻脊椎在軸向旋轉之勁度值圖表。 97圖5-1、骨釘螺旋線形式示意圖。

101圖5-2、骨釘螺旋多線設計示意圖[119]。 102圖5-3、螺紋嵌入人造骨材之情形。 103圖6-1、ASTM-F2193骨釘抗彎測試之實驗示意圖[176]。 123圖6-2、ASTM-F1717動態疲勞測試之實驗示意圖[102]。 124圖6-3、不同製程與不同比例添加物之骨生長比較[177]。 125