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痘苗病毒與宿主免疫之間的相互作用： 1.Vaccinia virus penetration factor (VPEF)/Fam21在 突細胞對抗白色念珠菌功能的重要性 2. 基於痘苗病毒的疫苗賦予保護性免疫敘利亞倉鼠中的 SARS-CoV-2 病毒。

為了解決921 Cargo tracking的問題，作者芮卡許 這樣論述：

1. 牛痘苗病毒(Vacv)屬於痘病毒科，是一種大型DNA病毒，宿主範圍廣，可感染哺乳動物細胞。我們之前對 HeLa 細胞的研究表明，牛痘成熟病毒被內吞到宿主細胞之胞內體中。在運送過程中利用胞內體內之pH酸化，病毒膜與胞內體膜融合，以釋放病毒內核進入細胞質，完成感染步驟。FAM21是 Wiskott-Aldrich Syndrome Protein and SCAR Homology (WASH) 蛋白複合物的一個組成成分，可介導內體膜上的肌動蛋白聚合，以促進含有貨物的囊泡從內體中分離出來。為了研究 FAM21 的體內功能，我們在 C57BL/6 小黑鼠中產生 FAM21 之剔除小鼠，主要以

表現FAM21 之CD11c 樹突細胞群作為剔除對象。來自 FAM21 (KO) 小鼠的骨髓衍生樹突細胞 (BMDC) 其吞噬能力、抗原修飾作用以及T細胞活化功能降低，可見得 FAM21 在樹突細胞 (DC) 功能中具有關鍵作用。 FAM21 KO BMDC細胞形態及細胞極性(Polarity)均有改善，因而影響到細胞移動。利用RNA微矩列分析 WT 和 FAM21 KO BMDC確定了TLR2/Clec4e訊息傳導路徑在 FAM21 KO 中減少。最後我們利用白色念珠菌感染小鼠膜腹腔中表現 KO老鼠 (1)抵抗力下降，死亡率增加 (2) 體內TLR2/Clec4e活化程度下降 (3) 白色念

珠菌在腎臟生長量增高。總結以上實驗結果證明FAM21對樹突細胞調節TLR2/Clec4e路徑十分重要。2. 新冠病毒 (SARS-CoV-2) 屬於冠狀病毒的 β 家族且可引起COVID-19的疾病。 SARS-CoV-2 導致 10-15% 的感染者顯現嚴重呼吸系統病徵以及 2-3% 的 死亡率，因此迫切需要疫苗來預防感染和控制病毒傳播。儘管目前市場上已 有以 mRNA 及腺病毒為基礎而產生的疫苗，但是它們對“冷鏈”運輸的依賴性 使得全球疫苗接種成為一項艱鉅的任務。在此情況下，穩定而易於輸送的凍 乾疫苗應有某些優勢。因此，建立另外的疫苗平台對因應 SARS CoV-2 和 未來出現的突變株仍

然至關重要。 牛痘苗病毒 (VACV) 已被用於根除天花疾病，而且具有便宜及方便運送之優 點。近來更已開發出幾種針對人類具有更高安全性的減毒病毒株。我們建構 了兩種痘苗病毒株 MVA-S 和 v-NY-S來表達全長 SARS-CoV-2 棘狀蛋白質 。 MVA-S 在哺乳動物細胞中生長受限且較為安全，而 v-NY-S 具有複製能 力刺激先天免疫效果較佳。此兩種疫苗在C57BL/6 小鼠中均可誘導出大量的 中和抗體，並產生了偏向 TH1 抗病毒的免疫反應。最重要的是，用 MVA-S 和 v-NY-S 對黃金倉鼠中進行感染，已接種疫苗之實驗組倉鼠可被保護，免 於 SARS-CoV-2 感染。可見得

這兩種疫苗是未來發展 最佳選擇。最後， 疫苗接種產生之中和抗體，並具有交叉中和 SARS-CoV-2 Delta 變異株之能力。

利用單一病毒追蹤觀察病毒運輸與細胞內進程

為了解決921 Cargo tracking的問題，作者瞿立威 這樣論述：

病毒生命週期涉及病毒與來自宿主細胞蛋白質、結構和機械的一系列複雜交互作用。抗病毒藥物的發展需要了解這些複雜的病毒感染機制。不幸的是，這幾種關鍵的分子機制在病毒感染過程中知之甚少。單一病毒跟踪是一種即時影像技術，可以成功監測活細胞中個別病毒運輸行為和過程的動力學。超分辨率顯微鏡則能觀察病毒顆粒與細胞次級結構的細節。在我們的研究中，超分辨率顯微鏡有助於我們區分登革病毒進入細胞的多樣途徑。使用單一病毒追踪則證明登革病毒進入細胞後從核內體運輸到自噬小體中。此外我們建立了pH感測器共軛的登革病毒及FRET標記的登革病毒分別用於觀察在自噬體中的酸化和病毒融合。這暗示登革病毒採用自噬作用途徑繞開細胞防禦系

統，並進行膜融合釋放病毒基因組以利複制的進行。另一方面，單病毒跟踪方法被用於研究HeLa細胞中牛痘病毒顆粒的運輸途徑。我們的研究結果表明，痘苗病毒運送到初級核內體，其中回收核內體蛋白Rab11和Rab22被徵集參與隨後的病毒運送，然後才能在細胞質中進行病毒脫鞘。